怎么讓液相色譜柱更穩(wěn)定?
點擊次數:1162 更新時間:2022-07-26
液相色譜柱是色譜分析過程中重要的部分,相當于人體的“心臟”。根據自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數將會造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。
液相色譜柱在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用,是色譜分析的核心部件。正確使用和維護色譜柱尤為重要,使用不當就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行,以保持色譜柱內填料的穩(wěn)定性。
即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
現代液相色譜分析中,色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時間,并且使方法更具穩(wěn)定性。硅膠基質:通用的基質,強度大,化學修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達到1—12)。
聚合物基質:多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學穩(wěn)定,應用pH范圍寬,具有更強的疏水性,對蛋白質等樣品分離效果較好;但強度較小,有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損,批次重復性較差,商品化色譜柱不多,一般價格較貴。載碳量:基質表面鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。