Hypersil液相色譜柱是什么東西
點擊次數(shù):1272 更新時間:2021-05-12
Hypersil液相色譜柱是什么?色譜是分離分析的一種手段,分離是核心,因此扮演分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的核心。色譜柱的要求是:柱的效率高,選擇性好,而分析的速度高。用于HPLC的市售各種顆粒填料為多孔硅膠,基于二氧化硅的鍵合相,氧化鋁,有機聚合物微球(包括離子交換樹脂),多孔碳等。粒徑通常為3、5、7、10um等。柱的理論值可以達到每米50,000至160,000。對于一般的分析,只需要5000個板就可以達到柱的效果;對于同源分析,僅500個就足夠了;對于更困難的分離物質對,最多可以使用20,000柱。因此,柱的長度通常約為10到30cm,可以滿足復雜混合物分析的需要。
柱的效率受柱的內部和外部因素影響。為了獲得色譜柱的最佳效率,除了柱之外的死體積小之外,還需要一種合理的柱結構(窮舉,可以減少填充床外部的死體積)和包裝技術。即使采用*填充技術,柱中心的填充條件和沿管壁的零件始終是不同的。管壁附近的零件較松散,容易形成通道,流速較快,這會影響沖洗劑的流動形狀。為了擴大范圍,這就是管壁效應。該管壁面積是從管壁內部開始的材料直徑厚度的大約30倍。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外部效應對柱效應的影響遠大于管壁效應。
色譜柱分為兩種:分析型和制備型
?、俪R?guī)分析柱(恒定柱),內徑2~5mm,柱長10~30厘米;
?、谡瓘街▋葟剑?,內徑1~2mm,柱長10~20cm;
?、勖毠苤?,內徑0.2~0.5mm;
④半制備的柱,內徑>5mm;
?、輰嶒炇覝蕚渲瑑葟?0~40mm,柱長10~30cm;
?、奚a準備柱內徑可以達到幾十厘米。
色譜柱的性能除了與固定相性能有關外,還與填充技術有關。在正常條件下,填料粒度>20um時,干法填充制備柱較為合適;顆粒<20um時,濕法填充較為理想。填充方法一般有四種:
①高壓勻漿法,多有用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充;
②徑向加壓法;
?、圯S向加壓法,主要用于裝填大直徑柱;
?、芨煞?,柱填充的技術性強,大多數(shù)實驗室使用己填充好的商品柱。
高效液相色譜柱的獲得,裝填技術是關鍵環(huán)節(jié),但根本問題還在于填料本身性能的優(yōu)劣,以及配套的色譜儀系統(tǒng)的結構是否合理。